خلفية الدراسة :- بكتريا المفطورات الرئوية من الممرضات المهمة للإنسان والتي تسبب إصابات القناة التنفسية المكتسبة من المجتمع. تشخيص الإصابة بهذه البكتريا ليست سهلة وكذلك حاسمة من اجل اختيار الوقت المناسب للبدء بالمضادات الحيوية.
هدف الدراسة:- صممت هذه الدراسة للكشف عن بكتريا المفطورات الرئوية في العينات المأخوذة من القناة التنفسية (مسحة الحنجرة, غسيل الحنجرة, البلغم) للمرضى المصابين بالتهاب القناة التنفسية باستخدام الفحوصات النوعية كتفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي. كذلك للفحص الكمي لتفاعل البلمرة المتسلسل للكشف عن وتقييس ألجين الهدف لبكتريا المفطورات الرئوية نوعيا وكميا.
المرضى وطرق العمل:-أنجزت الدراسة على 75مريضا و30 شخصا سليما كعينة للسيطرة. تم استخلاص الحامض النووي ( دنا) من العينات التنفسية البشرية , والجين (lipoprotein gene ) تم تضخيمه باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي. فحص السيطرة تم إدراجه في كل تجربة. الناتج المضخم تم الكشف عنه بالترحيل الكهربائي باستخدام جل الاكاروز (2% ) وتم توضيحه باستخدام صبغة ( Red safe ). تم استخدام برايمر وبروب خاص بتقنية ( TaqMan®) من خلال قناة. FAM البيانات تم تحليلها باستخدام برامج للعقل الإلكتروني الخاصة بجهاز Smart-cycler, عدد نسخ الحامض النووي منقوص الأوكسجين دنا تم تقديرها من خلال نقاط التقاطع بين حد العتبة لكل دورة و التراكيز القياسية.
النتائج: أربعة وثلاثين مريضا (45.5% ) أظهروا نتائج موجبة لفحص البلمرة المتسلسل, بينما اظهر 32 مريضا ( 42.6 %) نتيجة موجبة للفحص الكمي لتفاعل البلمرة المتسلسل. النسبة الأعلى للإصابة باستخدام كلا الفحصين الجزيئيين كانت للفئة العمرية الأقل من 20 سنة. كمية الحامض النووي دنا لبكتريا المفطورات الرئوية في النماذج التي أعطت نتيجة موجبة للفحص الكمي لتفاعل البلمرة المتسلسل تراوحت بين 10-2000 نسخة / مايكرولتر.
الاستنتاجات:- تبين من الدراسة الحالية ان كلا من الفحوص الجزيئية المستخدمة كتفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي و الفحص الكمي لتفاعل البلمرة المتسلسل تمتاز بأنها سريعة, موثوقة وكذلك مناسبة لتشخيص بكتريا المفطورات الرئوية باستخدام العينات التنفسية (مسحة الحنجرة, غسيل الحنجرة, البلغم).